药物分析就业前景分析|药物分析之西药分析——细胞色素C活力测定法

药物分析 2026-03-20 网络整理 可可

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    试剂
  (1) 磷酸盐缓冲液(0.2mol/l)
  取磷酸氢二钠71.64g,加水使溶解成1000ml,作为甲液。另取磷酸二氢钠27.60g,加水使溶解成1000ml,作为乙液。取甲液81ml与乙液19ml,混匀,调节ph值至7.3。
  (2) 磷酸盐缓冲液(0.1mol/l)
  取磷酸盐缓冲液(0.2mol/l)500ml,加水稀释成1000ml,调节ph值至7.3。
  (3) 磷酸盐缓冲液(0.02mol/l)
  取磷酸盐缓冲液 (0.2mol/l) 100ml,加水稀释成1000ml,调节ph值至7.3。
  (4) 琥珀酸盐溶液
  取琥珀酸与氢氧化钾各4.72g,加水使溶解成100ml,调节ph值至7.3。
  (5) 氰化钾溶液 取氰化钾0.65g,加水使溶解成100ml后,用稀硫酸调节ph值至7.3。
  (6) 去细胞色素c的心悬浮液

  取磷酸盐缓冲液(0.2mol/l)5ml、琥珀酸盐溶液1.0ml与供试品溶液0.5ml(如系还原型制剂,应加入0.01mol/l铁氰化钾溶液0.05ml),置25ml具塞比色管中,加去细胞色素c的心悬浮液0.5ml与氰化钾溶液1.0ml,加水稀释至10ml,摇匀,以同样的试剂作空白,照分光光度法(附录ⅳ a),在550nm的波长处附近,间隔0.5nm找出最大吸收波长,并测定吸收度,直至吸收度不再增大为止,作为酶还原吸收度;然后各加连二亚硫酸钠约 5mg,摇匀,放置约10分钟,在上述同一波长处测定吸收度,直至吸收度不再增大为止,作为化学还原吸收度;按下式计算。
            酶还原吸收度
  细胞色素c活力=───────────×100%
           化学还原吸收度

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