药物分析的四个步骤|药物分析辅导：四神丸含量测定方法
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四神丸处方为：肉豆蔻200g，补骨酯（盐炒）400g，五味子（醋制）200g，吴茱萸（制）100g，大枣（去核）200g。2005《中国药典》四神丸含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（30：70）为流动相；检测波长为245nm。理论板数按补骨酯素峰计应不低于6000。
供试品溶液的制备：取本品，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇100ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300w，频率33khz）20分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
文献报道的常用方法现介绍如下：
田玉先等hplc法测定四神丸中五味子乙素的含量，色谱柱为c18柱(4.6×200mm,5μm)，流动相为甲醇-四氢呋喃-水(64：4：32)，检测波长254nm。样品用正己烷索氏回流提取。
陈伟等用sfe-cgc法测定四神丸中补骨酯素和异补骨酯素的含量，样品用sfe法处理，采用含5%苯基硅氧烷交联毛细管柱，蒽为内标液。气化温度250，检测温度280，柱温210，载气n2，柱头压55kpa，分流比50：1。
甄攀等用hplc法测定四神丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量，色谱柱为ywg-c18 (250mm×4.6mm, 10μm)，流动相为水-甲醇-乙腈梯度洗脱：0-15min，水-甲醇-乙腈(40：30：30)；15-27min，乙腈-水(70：30)； 27min以后，水-甲醇-乙腈(40：30：30)。柱温30℃，检测波长225nm。
谭生建等梯度洗脱变换波长hplc测定四神丸中补骨酯素、异补骨酯素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量。以乙醇为溶剂，水浴回流提取。色谱柱为luna c18分析柱 (4.6mm ×250mm，粒径5μm)，ods保护柱(5mm×50mm,粒径5μm)，柱温36℃，流动相甲醇(a泵)和水(b泵)，流速0.8ml/min。流动相洗脱及检测波长变换程序：0.01min，λ296nm，b泵40%，14 min，b泵40%，16min，b泵28%，28min，290nm，38min，λ360nm，45min，b泵28%。
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